1.本发明涉及中药技术领域，具体为一种治疗血液粘稠导致动脉粥样硬化的药物及使用方法。
背景技术：2.动脉粥样硬化是冠心病、脑梗死等心脑血管疾病的主要病因之一，发病机制复杂，主要导致动脉粥样硬化的身体异常包括高血脂、糖尿病、高血压和肥胖等。内皮细胞功能障碍和损伤是粥样硬化病变的始动因素。本病多发生在40岁以上的中年人，随着年龄增加，发病率和死亡率也相应增加，男性多见。目前治疗动脉粥样硬化的药物包括降脂药物、抗凝溶栓药物、抗血小板药物等，这些西药如他汀类药物具有一定的不良反应，如会导致转氨酶、肌酸激酶升高和肌无力等，因此，有必要寻找替代治疗方法，在替代疗法中，中药治疗是一种很好的方法。
3.我国传统蒙药方，清血八味片，由寒水石、紫草、土木香、人工牛黄、栀子、瞿麦、石膏和甘草组成，具有清热凉血功效，主治清讧血，用于血热头痛、口渴目赤、中暑。中医用来治疗血热引起的头痛、口渴、目赤等症状。该方的制备方法包括：以上八味，人工牛黄、寒水石分别研细，紫草、土木香加乙醇回流提取一次，第一次2小时，第二次1.5小时滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩成膏；其余栀子等四味，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，煎液合并，滤过，浓缩成膏；与上述醇浸膏合并，加入寒水石粉，混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄配研混匀，制粒。经过多年研究，通过结合清血八味片的组方结构，研究更先进和精准的制备方法来制备有效成分含量更好的药物，发现清血八味片对血液粘稠导致动脉粥样硬化作用显著，同时，通过对该方制备方法的进一步研究，发现可以提高有效成分的含量，来提高成药的效果，为此，我们提出一种治疗血液粘稠导致动脉粥样硬化的药物及使用方法。
技术实现要素：4.本发明的目的在于提供一种治疗血液粘稠导致动脉粥样硬化的药物及使用方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
5.传统清血八味片，由寒水石、紫草、土木香、人工牛黄、栀子、瞿麦、石膏和甘草组成，其中寒水石15份、紫草15份、土木香3份、人工牛黄2 份、栀子8份、瞿麦1份、石膏2份、甘草2份，该方中，寒水石与紫草为方中主药，在原工艺基础上，对这两味药的制备工艺做进一步研究。
6.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
7.一种治疗血液粘稠导致动脉粥样硬化的药物，它由以下重量份的原料药制成：寒水石8-18份、紫草9-18份、土木香3-6份、人工牛黄1-3份、栀子4-10份、瞿麦1-5份、石膏2-3份、甘草1-3份。
8.该药物组方优选为：寒水石14-16份、紫草14-16份、土木香3-5份、人工牛黄1-2份、
栀子6-9份、瞿麦1-3份、石膏1-3份、甘草2-3份。
9.该药物组方进一步优选为：寒水石12份、紫草12份、土木香3份、人工牛黄1份、栀子4份、瞿麦1份、石膏2份、甘草1份。
10.该药物组方进一步优选为：寒水石18份、紫草18份、土木香4份、人工牛黄3份、栀子8份、瞿麦3份、石膏3份、甘草3份。
11.该药物组方进一步优选为：寒水石15份、紫草15份、土木香3份、人工牛黄2份、栀子8份、瞿麦1份、石膏2份、甘草2份。
12.该药物组合物的制备方法如下：
13.(1)人工牛黄、寒水石分别研细，寒水石硏细成200-500目细粉；
14.(2)紫草用6-10倍量60-90％乙醇微波提取2-3次，每次20-40min，提取温度60-90℃，微波功率400-800w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩；
15.(3)土木香每次加3-6倍量乙醇超声提取三次，第一次30-90min，第二次30-60min，第三次20-40min，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.05-1.25的浸膏；
16.(4)栀子，加8-12倍量水，煎煮提取1-3次，每次1-3小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.05-1.20，加水稀释，上大孔树脂柱，静态吸附 3-5小时，先用10-20倍生药量水洗脱杂质，再用15-25倍生药量的50-80％乙醇洗脱，洗脱流速为1-3倍生药量/ml，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.05-1.25的浸膏；
17.(5)其余瞿麦等三味加6-10倍量水煎煮二次，第一次2-4小时，第二次1-3小时，煎液合并，滤过，减压浓缩至相对密度1.05～1.25的浸膏，与步骤(2)-(4)的浸膏合并，加入寒水石粉混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄粉配研混匀，加入适量淀粉制粒，干燥，压片，包薄膜衣，即得。
18.更优选的制备方法之一是：
19.(1)人工牛黄、寒水石分别研细，寒水石硏细成300-400目细粉；
20.(2)紫草用6-10倍量70-80％乙醇微波提取2-3次，每次20-30min，提取温度60-90℃，微波功率400w-600w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.05-1.20；
21.(3)土木香每次加3-6倍量乙醇超声提取三次，第一次90min，第二次 60min，第三次30min，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度 1.05-1.25的浸膏；
22.(4)栀子，加8-10倍量水，煎煮提取1-3次，每次1-3小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.05-1.20，加水稀释，上大孔树脂柱，静态吸附 3-5小时，先用12-18倍生药量水洗脱杂质，再用15-25倍生药量的50-80％乙醇洗脱，洗脱流速为1-3倍生药量/ml，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.05-1.25的浸膏；
23.(5)其余瞿麦等三味加6-10倍量水煎煮二次，第一次2-4小时，第二次1-3小时，煎液合并，滤过，减压浓缩至相对密度1.05～1.25的浸膏，与步骤(2)-(4)的浸膏合并，加入寒水石粉混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄粉配研混匀，加入适量淀粉制粒，干燥，压片，包薄膜衣，即得。
24.更优选的制备方法之二是：
25.(1)人工牛黄、寒水石分别研细，寒水石硏细成300目细粉；
26.(2)紫草用9倍量80％乙醇微波提取2次，每次20min，提取温度70℃，微波功率500w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.10；
27.(3)土木香每次加5倍量乙醇超声提取三次，第一次90min，第二次60min，第三次30min，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.05-1.25 的浸膏；
28.(4)栀子，加10倍量水，煎煮提取1-3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.05-1.20，加水稀释，上大孔树脂柱，静态吸附3-5 小时，先用15-18倍生药量水洗脱杂质，再用15-25倍生药量的50-80％乙醇洗脱，洗脱流速为1-3倍生药量/ml，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.15的浸膏；
29.(5)其余瞿麦等三味加6倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5 小时，煎液合并，滤过，减压浓缩至相对密度1.05的浸膏，与步骤(2)-(4) 的浸膏合并，加入寒水石粉混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄粉配研混匀，加入适量淀粉制粒，干燥，压片，包薄膜衣，即得。
30.进一步优选的制备方法是：
31.(1)人工牛黄、寒水石分别研细，寒水石硏细成400目细粉；
32.(2)紫草用10倍量75％乙醇微波提取2次，每次30min，提取温度分别为70℃，微波功率400w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度 1.10；
33.(3)土木香每次加5倍量乙醇超声提取三次，第一次90min，第二次60min，第三次30min，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.20的浸膏；
34.(4)栀子，加10倍量水，煎煮提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10，加水稀释，上大孔树脂柱，静态吸附5小时，先用15倍生药量水洗脱杂质，再用20倍生药量的70％乙醇洗脱，洗脱流速为3 倍生药量/ml，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.15的浸膏；
35.(5)其余瞿麦等三味加6倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5 小时，煎液合并，滤过，减压浓缩至相对密度1.05的浸膏，与步骤(2)-(4) 的浸膏合并，加入寒水石粉混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄粉配研混匀，加入适量淀粉制粒，干燥，压片，包薄膜衣，即得。
36.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
37.1.该发明经过工艺考察，确定主要药味寒水石的硏细目数，利于人体吸收，提高生物利用度；
38.2.该发明单独提取主要药味紫草，考察提取工艺，提高有效成分紫草素等的含量，提高清血八味药物的生物利用度。
具体实施方式
39.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例,基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
40.为了便于理解本发明，下面将参照相关对本发明进行更全面的描述。给出了本发明的若干实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容更加透彻全面。
41.需要说明的是，当元件被称为“固设于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上
或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的。
42.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
43.请参阅表1-8，下面将对部分工艺筛选步骤进行说明
44.1.紫草工艺筛选步骤
45.1.1提取方法的选择
46.乙醇回流法：紫草加75％乙醇回流提取，第一次2小时，第二次1.5小时滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.10的浸膏；
47.超声提取法：紫草加75％乙醇超声提取，第一次120min，第二次90min，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.10的浸膏；
48.微波萃取法：紫草加75％乙醇微波萃取，第一次20min，第二次30min，微波频率1000mhz，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.10 的浸膏；
49.比较三者中紫草素的含量，乙醇回流法中紫草素含量为4.32％，超声提取法的紫草素含量为5.65％，微波萃取法中紫草素含量为7.81％，可以看出微波萃取法中紫草素的含量最高，因此，选择微波萃取法提取紫草。
50.1.2提取工艺条件的筛选
51.①
提取次数的选择：提取条件同上，分别微波萃取1次、2次、3次、4 次，最后比较浸膏中紫草素的含量，结果如下表1。
52.提取次数紫草素含量15.63％27.81％37.92％47.96％
53.表1
54.微波萃取2次后，紫草素含量基本不变，因此确定最佳微波萃取次数为2 次。
55.②
乙醇浓度的考察：提取条件同上，分别考察60％、70％、75％、80％乙醇，最后比较浸膏中紫草素的含量，结果如下表2。
56.乙醇浓度紫草素含量60％4.21％70％5.43％75％7.81％80％6.33％
57.表2
58.从结果可以看出，75％浓度的乙醇提取紫草素含量最大。
59.③
微波提取功率的考察：提取条件同上，分别考察400w/500w/600w/700 的微波功
率，最后考察浸膏中紫草素的含量，结果如下表3。
[0060][0061][0062]
表3
[0063]
从结果可以看出，600w的微波功率提取的紫草素含量最高。
[0064]
④
微波提取时间的考察：提取条件同上，分别考察第一次、第二次微波萃取时间，a第一次20min，第二次30min；b第一次30min，第二次30min； c第一次10min，第二次20min；d第一次20min，第二次20min，最后考察浸膏中紫草素的含量，结果如下表4。
[0065]
萃取时间紫草素含量a7.81％b8.32％c5.68％d6.83％
[0066]
表4
[0067]
从结果可以看出，两次分别萃取时间30min时，紫草素的含量最高。
[0068]
⑤
乙醇用量的考察：紫草分别用6、8、10、12倍量75％乙醇微波提取2 次，每次30min，提取温度60℃，微波功率600w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.10。最后考察浸膏中紫草素的含量，结果如下表 5。
[0069]
乙醇用量紫草素含量67.81％87.62％108.45％127.39％
[0070]
表5
[0071]
从结果看出，10倍量乙醇提取的紫草素含量最高，但其他用量的乙醇对紫草素含量影响不显著。
[0072]
⑥
微波提取温度的考察：紫草用10倍量75％乙醇微波提取2次，每次30min，提取温度分别为60℃、70℃、80℃、90℃，微波功率600w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.10；最后考察紫草素的含量，结果如下表6。
[0073]
微波萃取温度紫草素含量607.13％
709.21％806.84％905.39％
[0074]
表6
[0075]
从结果看，萃取温度70℃为最佳，且萃取温度对紫草素的含量影响较大。
[0076]
按照上述考察参数，确定最佳提取紫草的工艺条件为：紫草用10倍量75％乙醇微波提取2次，每次30min，提取温度分别为70℃，微波功率600w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.10。最后检测浸膏中紫草素的含量为9.21％，较乙醇提取和超声提取，紫草素含量提高显著；调整微波萃取功率、温度和时间后，紫草素的提取率显著提高。
[0077]
2.寒水石硏细粒度考察
[0078]
通过对寒水石的粒径考察，发现在合适的粒径范围内，特别是最佳粒径，对动脉粥样硬化模型大鼠的主动脉血管壁的形态特征有显著改善。
[0079]
实施例1
[0080]
寒水石15份、紫草15份、土木香3份、人工牛黄2份、栀子8份、瞿麦1份、石膏2份、甘草2份。
[0081]
(1)人工牛黄、寒水石分别研细，寒水石硏细成400目细粉；
[0082]
(2)紫草用10倍量75％乙醇微波提取2次，每次30min，提取温度分别为70℃，微波功率600w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度 1.10；
[0083]
(3)土木香每次加5倍量乙醇超声提取三次，第一次90min，第二次60min，第三次30min，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.20的浸膏；
[0084]
(4)栀子，加10倍量水，煎煮提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10，加水稀释，上大孔树脂柱，静态吸附5小时，先用15倍生药量水洗脱杂质，再用20倍生药量的70％乙醇洗脱，洗脱流速为3 倍生药量/ml，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.15的浸膏；
[0085]
(5)其余瞿麦等三味加6倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5 小时，煎液合并，滤过，减压浓缩至相对密度1.05的浸膏，与步骤(2)-(4) 的浸膏合并，加入寒水石粉混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄粉配研混匀，加入适量淀粉制粒，干燥，压片，包薄膜衣，即得。
[0086]
实施例2
[0087]
寒水石15份、紫草15份、土木香3份、人工牛黄2份、栀子8份、瞿麦1份、石膏2份、甘草2份。
[0088]
步骤(1)中寒水石研细为300目细粉，其他步骤同实施例1
[0089]
实施例3
[0090]
寒水石15份、紫草15份、土木香3份、人工牛黄2份、栀子8份、瞿麦1份、石膏2份、甘草2份。
[0091]
步骤(1)中寒水石研细为500目细粉，其他步骤同实施例1
[0092]
实施例4
[0093]
寒水石18份、紫草18份、土木香4份、人工牛黄3份、栀子8份、瞿麦3份、石膏3份、甘草3份；
[0094]
(1)人工牛黄、寒水石分别研细，寒水石硏细成300目细粉；
[0095]
(2)紫草用9倍量80％乙醇微波提取2次，每次20min，提取温度70℃，微波功率500w，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度；
[0096]
(3)土木香每次加5倍量乙醇超声提取三次，第一次90min，第二次60min，第三次30min，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.05-1.25 的浸膏；
[0097]
(4)栀子，加10倍量水，煎煮提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.15，加水稀释，上大孔树脂柱，静态吸附5小时，先用15倍生药量水洗脱杂质，再用25倍生药量的70％乙醇洗脱，洗脱流速为2 倍生药量/ml，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.15的浸膏；
[0098]
(5)其余瞿麦等三味加6倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5 小时，煎液合并，滤过，减压浓缩至相对密度1.05的浸膏，与步骤(2)-(4) 的浸膏合并，加入寒水石粉混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄粉配研混匀，加入适量淀粉制粒，干燥，压片，包薄膜衣，即得。
[0099]
对比例1
[0100]
寒水石17份、紫草17份、土木香2.6份、人工牛黄2.2份、栀子7份、瞿麦3份、石膏2.1份、甘草1份。
[0101]
人工牛黄、寒水石分别研细，紫草、土木香加乙醇回流提取一次，第一次2小时，第二次1.5小时滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩成膏；其余栀子等四味，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，煎液合并，滤过，浓缩成膏；与上述醇浸膏合并，加入寒水石粉，混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄配研混匀，加入适量淀粉制粒，干燥，压制成片，包薄膜衣，即得。
[0102]
对比例2
[0103]
(1)人工牛黄、寒水石分别研细；
[0104]
(2)紫草、土木香每次加5倍量乙醇超声提取三次，第一次90min，第二次60min，第三次30min，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.20的浸膏；
[0105]
(3)栀子，加10倍量水，煎煮提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10，加水稀释，上大孔树脂柱，静态吸附5小时，先用15倍生药量水洗脱杂质，再用20倍生药量的70％乙醇洗脱，洗脱流速为3 倍生药量/ml，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.15的浸膏；
[0106]
(4)其余瞿麦等三味加6倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5 小时，煎液合并，滤过，减压浓缩至相对密度1.05的浸膏，与步骤(2)(3) 的浸膏合并，加入寒水石粉混匀，低温干燥，粉碎成细粉，与人工牛黄粉配研混匀，加入适量淀粉制粒，干燥，压制成1000片，包薄膜衣，即得。
[0107]
清血八味片抗动脉粥样硬化效果研究
[0108]
1.对小鼠血脂水平的影响
[0109]
(1)试验动物
[0110]
健康雄性8周龄小鼠
[0111]
(2)试验药物
[0112]
实施例1-4，对比例1-2获得的药物。
[0113]
(3)实验方法
[0114]
根据受试药物分组，每组10只，设定为模型组，对照组即对比例1-2，受试药物组1-4即实施例1-4，正常组，阳性对照组(辛伐他汀组)。
[0115]
使用大剂量维生素d加高胆固醇饲料法诱导动脉粥样硬化大鼠模型：其中，前3天除正常组小鼠外，其余所有大鼠连续口服维生素d330000iu/(kg
·
d), 并都给予正常饲料；从第4天开始，正常组饲喂正常饲料，其余组均饲喂高脂饲料，同时对照组每天灌胃对比例1-2的药物，受试药物组每天灌胃实施例1-4组药物，阳性对照组每天灌胃辛伐他汀，以上各组每天灌胃1次，连续7周。
[0116]
(4)血清中脂质的测定
[0117]
在实验结束时，将隔夜禁食的大鼠通过眶后神经丛收集血样，测定tc、 tg、hdl-c，ldl-c含量。抗动脉粥样硬化指数(aai)的计算公式如下： aai＝hdl-c/(tc-hdl-c)。结果如下表7：
[0118][0119][0120]
表7
[0121]
从模型组与对照组的血清水平比较可以看出，动脉粥样硬化模型造模成功。受试药物组、对照组与阳性药物组的小鼠血脂情况得到显著改善。抗动脉粥样硬化指数结果显示受试药物组均对aai影响显著，其中，受试药物组1 对aai的影响最显著，与对照组1-2相
比均有显著性差异，效果最好，采用本技术方法提取得到的清血八味片较原工艺以及对比例2(申请人在原工艺上的改进)对aai影响更显著，具有预料不到的技术效果，这与主要药味的工艺改进相关，提高有效成分含量，改进研细粒度，提高生物利用度。
[0122]
(5)肝脏中脂质的测定：取肝组织，冰生理盐水冲洗，滤纸吸湿后称取 0.4g左右，加入预冷的生理盐水制成10％肝匀浆，离心，取上清液，采用酶法测定tc、tg含量。结果如下表8：
[0123][0124][0125]
表8
[0126]
从结果可见，模型组tc/tg水平显著升高，受试药物组的肝脏脂质改善明显，其中受试药物组1对小鼠肝脏脂质改善较其他组更为明显，接近与阳性药物辛伐他汀组。采用本技术方法提取得到的血清八味片较原工艺以及对比例2对小鼠肝脏脂质改善更显著。
[0127]
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
